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揭曉:ELISA試劑盒技術(shù)員的實(shí)驗(yàn)秘技

近日有位客戶致電給我司業(yè)務(wù)員，抱怨ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)太難，掌握不好，一不小心就毀了實(shí)驗(yàn)。我司業(yè)務(wù)員表示，一定要有全面的準(zhǔn)備，不能放棄，多加學(xué)習(xí)多加練習(xí)，可以隨時(shí)聯(lián)系我們的售后技術(shù)員指導(dǎo)。其實(shí)ELISA實(shí)驗(yàn)并沒(méi)有那么難，今天我們一起來(lái)看上海恒遠(yuǎn)揭曉:ELISA試劑盒技術(shù)員的實(shí)驗(yàn)秘技

第一、吸光度值偏高是怎會(huì)回事？ 可能引起的原因有孵育的溫度過(guò)高、反應(yīng)的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。相對(duì)應(yīng)的解決辦法是調(diào)整孵育環(huán)境的溫度，如無(wú)法調(diào)整室內(nèi)的溫度，請(qǐng)將顯色時(shí)間適當(dāng)?shù)目s短、控制反應(yīng)時(shí)間。

第二、檢測(cè)的結(jié)果沒(méi)有吸光度值或吸光度值很低怎么辦？ 首先我們來(lái)看下原因，可能引起的原因有試劑盒已過(guò)有效期、使用的試劑盒內(nèi)容物不是同一個(gè)批次的、沒(méi)加入酶標(biāo)記物、試劑盒的內(nèi)容物沒(méi)有充分的回溫、孵育的溫度太低等，相對(duì)應(yīng)的解決辦法是更換成在有效期以內(nèi)的試劑盒、使用同～個(gè)批次的試劑盒的內(nèi)容物、按照試劑盒說(shuō)明書中的步驟進(jìn)行操作、將試劑盒的內(nèi)容物充分的回溫后再進(jìn)行操作、在實(shí)驗(yàn)操作的整個(gè)過(guò)程中請(qǐng)仔細(xì)觀察恒溫箱的溫度。

第三、陰性樣本的吸光度值低于陽(yáng)性吸光度值的解決方案 可能引起的原因是出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象或酶標(biāo)板孔中的試劑未充分的混合。解決的辦法是注意操作的方法，注意洗滌時(shí)的方法、加完試劑后可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30s，混勻液體。

第四、標(biāo)準(zhǔn)曲線的問(wèn)題 線性不好，或平行性不好(雙孔對(duì)照孔的OD值差別很大)，或出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象可能引起的原因有酶標(biāo)板孔間相互污染、洗板后未能盡快進(jìn)行下一步操作、添加樣品或其它試劑時(shí)操作的方法不對(duì)、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒(méi)有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標(biāo)板孔問(wèn)加入的試劑量不同，相對(duì)應(yīng)的解決辦法是加樣時(shí)請(qǐng)小心勿將液體濺人另一孔中，人工洗板時(shí)也請(qǐng)小心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時(shí)進(jìn)行下一步操作、添加試劑時(shí)請(qǐng)懸空滴入，切記勿將頭接觸到板孔內(nèi)，吸取不同試劑瓶中的液體時(shí)就要更換一次頭、確認(rèn)孵育環(huán)境不透光，蓋板膜將酶標(biāo)板密封好、使用已校正過(guò)的微量加樣器，如將第一次加入液體時(shí)頭上留有一滴的液體滴下，那么將以后頭上留有的液體也滴下，以保證加入液體體積的一致性。

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