ELISA實驗中可能影響結(jié)果的原因及解決方法

樣品收集和保存： 用于ELISA測定常用的標本是血清（漿）。要注意避免嚴重溶血，因為血紅蛋白中含有具有類似過氧化物活性的血紅素基團，在孵育時很容易吸附于固相，與HRP底物反應產(chǎn)生假陽性。 樣品采集及血清分離中要注意避免細菌污染，一方面細菌分泌的酶可能對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用，另一方面，細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶會對相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。 樣品應該要避免反復凍融。因反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。另外，樣品混勻時，不要劇烈振蕩，反復顛倒混勻即可。 一般而言，如果在收集樣品的當天進行檢測，可將樣品及時儲存在4℃?zhèn)溆?；而對隔天再檢測的樣本，應及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，若要長期保存樣品，好將其置于-70℃凍存。

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